VEGF shRNA表达质粒的构建及对绵羊卵泡颗粒细胞增殖的影响

本研究根据绵羊VEGF基因mRNA序列设计并合成3条shRNA寡核苷酸片段,构建表达质粒并通过脂质体介导转染绵羊卵泡颗粒细胞,采用MTT、ALP方法检测VEGF shRNA重组质粒对绵羊卵泡颗粒细胞增殖的影响及Western Blot方法检测VEGF蛋白的表达。结果表明:经酶切和测序鉴定,成功构建了表达shRNA的3条重组质粒;3条VEGF shRNA质粒均可抑制绵羊卵泡颗粒的增殖,VEGF蛋白表达水平也明显降低,从而说明VEGF能够促进绵羊卵泡颗粒细胞的增殖。