猪源大肠杆菌O157∶H7鞭毛蛋白抗原表位分析及验证

利用生物信息学分析大肠杆菌O157∶H7鞭毛蛋白FliC的二级结构及亲水性、抗原指数、柔性区域和表面可能性等指数,预测大肠杆菌O157∶H7鞭毛蛋白FliC的潜在B细胞抗原表位,为其致病性研究提供理论基础。利用DNAStar软件Protean程序中Garnier-Robson方法和Chou-Fasman方法分析鞭毛蛋白FliC的α-螺旋、β-折叠、转角区域和卷曲区域,通过Kyte-Doolittle方法、Karplus-Schulz方法、Emini方法和Jameson-Wolf方法分析鞭毛蛋白FliC的亲水性、柔性区域、表面可能性和抗原指数。综合分析得出鞭毛蛋白FliC 63—74、236—247、338—349、460—471、542—553位氨基酸序列为潜在的B细胞优势抗原表位。化学合成法合成优势抗原表位338—349和460—471肽段,免疫BALB/c小鼠3次后,采用ELISA方法验证抗体水平。ELISA结果显示,338—349、460—471肽段具有很强的抗原性,能引起BALB/c小鼠产生高滴度的抗体。