| 盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备和鉴定 |
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| 引用本文： | 张玲玲,战翔,彭喆,时建立,吴晓燕,徐胜男,郑书轩,徐绍建,黄保华,李俊. 盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备和鉴定[J]. 中国动物检疫, 2017, 34(2): 91-95 |
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| 作者姓名： | 张玲玲 战翔 彭喆 时建立 吴晓燕 徐胜男 郑书轩 徐绍建 黄保华 李俊 |
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| 基金项目： | “十三五”国家重点研发计划（2016YFD0500708）；山东省现代农业产业技术体系疫病控制岗位（SDAIT-08-07）；山东省农业重大应用技术创新课题；山东省科技发展计划（2014GNC111011）；山东省农业科学院青年英才培养工程；山东省农业科学院青年科研基金项目（2016YQN53） |
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| 摘 要： | 为进一步建立克伦特罗(CL)残留检测方法,给制备CL残留检测试剂盒打下基础,进行了CL单克隆抗体(McAb)的制备研究。以重氮反应,将CL与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备免疫原和检测原,并通过杂交瘤技术,获得了5株能稳定分泌特异结合CL小分子的单克隆抗体杂交瘤细胞株(1E9A9、2A9C1、3F2E9、6G2E9、6E10D9)。这5株细胞株经过体外传代培养和冻存复苏后均能稳定分泌抗体。用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定的这5株细胞上清液抗体效价分别为1:1.28×10~5、1:5.12×10~5、1:1.28×10~5、1:5.12×10~5、1:2.56×10~5;选用3F2E9、6E10D9细胞株,制备CL单克隆抗体腹水并纯化,其纯化后的腹水抗体效价分别为1:1.28×10~5、1:2.56×10~5,BCA(2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠)方法检测的浓度分别为1.60 mg/mL、1.54 mg/mL;最终通过斑点ELISA(Dot-ELISA)方法测定CL抗原与这2株抗体有较强的结合力。在上述方法的制备及验证下,成功获得了特异性较高的CL单克隆抗体,为进一步研制CL残留检测试剂盒奠定了基础。
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| 关 键 词： | 盐酸克伦特罗；单克隆抗体；残留检测 |
Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies against Clenbuterol |
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| Zhang Lingling,Zhan Xiang,Peng Zhe,Shi Jianli,Wu Xiaoyan,Xu Shengnan,Zheng Shuxuan,Xu Shaojian,Huang Baohu,Li Jun. Preparation and Identification of Monoclonal Antibodies against Clenbuterol[J]. China Animal Health Inspection, 2017, 34(2): 91-95 |
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| Authors: | Zhang Lingling Zhan Xiang Peng Zhe Shi Jianli Wu Xiaoyan Xu Shengnan Zheng Shuxuan Xu Shaojian Huang Baohu Li Jun |
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