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野生大麦ISSR-PCR反应体系的正交优化研究
引用本文:张韬,聂洪丽,陈颖骁,任正隆. 野生大麦ISSR-PCR反应体系的正交优化研究[J]. 安徽农业科学, 2007, 35(32): 10248-10249
作者姓名:张韬  聂洪丽  陈颖骁  任正隆
作者单位:电子科技大学生命科学与技术学院,四川成都,610054;电子科技大学生命科学与技术学院,四川成都,610054;电子科技大学生命科学与技术学院,四川成都,610054;电子科技大学生命科学与技术学院,四川成都,610054
摘    要:利用SPSS建立正交试验体系,从Taq酶、Mg2+离子、dNTP、模板、引物的浓度5个水平对大麦ISSR反应体系进行优化,确定了适合大麦的快速高效ISSR反应体系。试验结果表明,在25μl反应体系中各反应成分为:0.5 U Taq酶,1μmol/L Mg2+,0.2μmol/LdNTP,0.3μmol/L引物,50 ng模板DNA。这一反应体系的建立对利用ISSR-PCR进行大麦种质资源的分类和新基因资源的挖掘打下了坚实的基础。

关 键 词:大麦  ISSR  SPSS  正交设计
文章编号:0517-6611(2007)32-10248-02
修稿时间:2007-06-12

Optimization for ISSR Reaction System of Hordeum vulgate subsp. Vulgare with Orthogonal Design
ZHANG Tao et al. Optimization for ISSR Reaction System of Hordeum vulgate subsp. Vulgare with Orthogonal Design[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2007, 35(32): 10248-10249
Authors:ZHANG Tao et al
Affiliation:College of Life Science and Technology, University of Electronic Science and Technology, Chengdu, Siehuan 610054
Abstract:Five factors(Taq polymerase,Mg2+,dNTP,primer,DNA template) of Hordeum vulgare subsp.Vulgare(barley) ISSR amplification system were optimized using ISSR reaction system to analyze the evolutional relationship of barley.And then the optimum reaction system which contained 0.5 U Taq polymerase,1 μmol/L Mg2+,0.2 μmol/L dNTP,0.3 μmol/L primer,50 ng DNA template in a total volume of 25 μl amplification system was established.The optimum reaction system contributed greatly to use the ISSR-PCR technology to classify the quality of Hordeum vulgare subsp.Vulgare and mine the new genes.
Keywords:Hordeum vulgare subsp.Vulgare  ISSR  SPSS  Orthogonal design
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