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抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
引用本文:胡茂志,焦新安,潘志明,邵国青,刘秀梵.抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J].中国兽医学报,2006,26(6):619-621.
作者姓名:胡茂志  焦新安  潘志明  邵国青  刘秀梵
作者单位:1. 扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏,扬州,225009
2. 扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏,扬州,225009;扬州大学,生物科学与技术学院,江苏,扬州,225009
3. 扬州大学,生物科学与技术学院,江苏,扬州,225009
4. 江苏省农业科学院兽医研究所,江苏,南京,210014
基金项目:高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划;江苏省六大人才高峰基金;江苏省三药工程项目
摘    要:表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀。可溶性表达产物亲和层析纯化后用于单抗筛选;同时,用GST-P36包涵体抗原腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只)。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了1株能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株5A7-2。生物学特性鉴定表明,腹水单抗的间接ELISA效价为1∶2.5×106;免疫球蛋白亚类为IgG2a。免疫印迹结果显示,腹水单抗能与GST-P36融合蛋白反应而不与谷胱苷肽转移酶(GST)反应,并且在猪肺炎支原体(Mycop lasma hyopneumoniae,Mhp)蛋白36000位置也有明显的条带,说明5A7-2所分泌的是针对MhpP36蛋白的单抗。P36蛋白是Mhp种特异性蛋白,其单克隆抗体的制备,为Mhp种特异性检测方法的建立奠定了基础。

关 键 词:猪肺炎支原体  P36蛋白  单克隆抗体
文章编号:1005-4545(2006)06-0619-03
收稿时间:2004-10-14
修稿时间:2004年10月14

Development of Monoclonal Antibody against P36 Protein of Mycoplasma hyopneumoniae
HU Mao-zhi,JIAO Xi-nan,PAN Zhi-ming,SHAO Guo-qing,LIU Xiu-fan.Development of Monoclonal Antibody against P36 Protein of Mycoplasma hyopneumoniae[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2006,26(6):619-621.
Authors:HU Mao-zhi  JIAO Xi-nan  PAN Zhi-ming  SHAO Guo-qing  LIU Xiu-fan
Abstract:
Keywords:Mycoplasma hyopneumoniae  monoclonal antibody  P36 protein
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