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甜瓜N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶基因(CmGnT)RNA干扰载体的构建
作者姓名:张瑞腾  付秋实  马太光  郭秀霞  李灵芝  郭仰东  王怀松
作者单位:(;1.山西农业大学园艺学院,山西太谷 030801;;2.中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京 100081;;3.中国农业大学园艺学院,北京 100193)
摘    要:为探讨甜瓜N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶基因(CmGnT)的功能,选取甜瓜CmGnT基因保守序列,利用特异性引物PCR扩增得到一段238 bp的干扰片段。利用Swa I单酶切将正向片段亚克隆到质粒载体p FGC1008的35S启动子与GUS之间,利用Spe I单酶切将反向片段亚克隆到质粒载体p FGC1008的GUS与终止子之间,构建了RNAi表达载体p FGC1008-CmGnT。通过冻融法将其转入根癌农杆菌C58中,菌液PCR验证表明RNAi表达载体p FGC1008-CmGnT构建成功并成功转入农杆菌。为进一步研究甜瓜CmGnT基因功能及甜瓜分子育种奠定重要基础。

关 键 词:甜瓜  CmGnT 基因  RNA 干扰  载体构建  
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