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堆型艾美耳球虫外分泌蛋白致细胞损伤研究
引用本文:王黎霞,黄芳,张建军,安健. 堆型艾美耳球虫外分泌蛋白致细胞损伤研究[J]. 北京农学院学报, 2021, 36(1): 100-104. DOI: 10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2021.0118
作者姓名:王黎霞  黄芳  张建军  安健
作者单位:北京农业职业学院牧医系 北京102442;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206
基金项目:北京市特色高水平骨干专业群项目-动物医学专业群项目-技术平台与社会服务建设项目;北京农业职业学院院级科研项目
摘    要:[目的]研究堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)外分泌蛋白是否具有外毒素和致细胞损伤作用.[方法]将牛肾传代细胞与E.acervulina子孢子共培养2.5h,更换无血清培养液,每间隔12 h收集入侵后0~60 h的该时间点前12 h所有培养液并透析浓缩,SDS-PAGE和Western Blot检测,确定E.acervulina的外分泌蛋白,将此蛋白加培养液培养牛肾传代细胞,利用吖啶橙和碘化丙啶染色,判断细胞损伤. [结果]E.acervulina分泌约70 kD的蛋白,12~24 h分泌蛋白最多,24~36 h蛋白分泌量明显下降,36~48 h以后几乎看不到蛋白带,0~12 h和48~60 h看不到外分泌蛋白,用含该蛋白的培养液培养牛肾传代细胞,细胞膜和核膜的通透性增加,[结论]E.acervulina第一代裂殖生殖时分泌约70 kD的蛋白,该蛋白损伤细胞膜和核膜,证明该蛋白具有球虫毒素的功能.

关 键 词:堆型艾美耳球虫  体外培养  外分泌蛋白  细胞损伤

Study of cell damage under exocrine protein of Eimeria acervulina
WANG Lixia,HUANG Fang,ZHANG Jianjun,AN Jian. Study of cell damage under exocrine protein of Eimeria acervulina[J]. Journal of Beijing Agricultural College, 2021, 36(1): 100-104. DOI: 10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2021.0118
Authors:WANG Lixia  HUANG Fang  ZHANG Jianjun  AN Jian
Abstract:
Keywords:
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