河南长白猪白细胞介素18基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 |
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引用本文: | 段永兰,赵丽.河南长白猪白细胞介素18基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].黑龙江畜牧兽医,2012(9):52-54. |
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作者姓名: | 段永兰 赵丽 |
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作者单位: | 河南工业贸易职业学院;郑州牧业工程高等专科学校 |
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基金项目: | 河南省科技攻关项目(2009B230016);河南省高校青年骨干教师资助项目(2011GGJS-194) |
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摘 要: | 为了获取河南长白猪白细胞介素18(IL-18)基因的表达产物,试验从6月龄河南长白猪脾脏分离的淋巴细胞中提取总RNA,然后进行RT-PCR扩增,对扩增产物克隆、测序后获得河南长白猪IL-18基因成熟蛋白序列。利用基因重组技术将河南长白猪IL-18成熟蛋白编码区(500 bp)定向插入原核表达载体pQE30中,构建重组表达质粒pQE-pIL-18,转化大肠杆菌M15,并用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导。结果表明:经序列分析,河南长白猪IL-18基因全长为500 bp;SDS-PAGE分析可检测到分子质量约为45 ku的重组蛋白。
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关 键 词: | 河南长白猪 白细胞介素18(IL-18) 克隆 原核表达 |
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