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建立PCR-ELISA方法检测单核细胞增多性李斯特菌
引用本文:谭炳乾,何启盖,肖军,金梅林,陈焕春.建立PCR-ELISA方法检测单核细胞增多性李斯特菌[J].农业生物技术学报,2008,16(4).
作者姓名:谭炳乾  何启盖  肖军  金梅林  陈焕春
作者单位:1. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;襄樊出入境检验检疫局,襄樊,441003
2. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070
3. 襄樊出入境检验检疫局,襄樊,441003
基金项目:湖北出入境检验检疫局科技攻关项目,湖北省襄樊市科技攻关项目
摘    要:针对hlyA基因设计特异性引物和探针,在上游引物5?#31471;标记生物素,核酸探针的3?#31471;标记地高辛,将PCR扩增、核酸液相杂交以及酶联显色技术结合,并对检测条件进行了优化,建立了PCR和PCR-ELISA检测食品样品中单核细胞增多性李斯特菌的方法。经对试验菌株检测表明,PCR 、PCR-ELISA方法检测单核细胞增多性李斯特菌能扩增出特异片段,其它李斯特菌、大肠杆菌和沙门氏菌等扩增检测结果是阴性。对60个样品进行检测表明,与SN/T0148.1-2005方法相比, PCR-ELISA方法具有更高的敏感性。与PCR产物电泳法检测比较,PCR-ELISA方法进一步提高检测方法的敏感性和特异性,敏感性高于前者150倍以上,并适合批量样品的检测分析。

关 键 词:单核细胞增多性李斯特菌  PCR  PCR-ELISA
收稿时间:2007-7-18
修稿时间:2007-10-23

Development of PCR-ELISA for Identification of Listeda monocytogenes
TAN Bing-qian,HE Qi-gai,XIAO Jun,JIN Mei-lin,CHEN Huan-chun.Development of PCR-ELISA for Identification of Listeda monocytogenes[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2008,16(4).
Authors:TAN Bing-qian  HE Qi-gai  XIAO Jun  JIN Mei-lin  CHEN Huan-chun
Abstract:
Keywords:PCR  PCR-ELISA
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