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条锈菌诱导的小麦β-1,3-葡聚糖酶基因编码区的克隆及原核表达
引用本文:刘 博,崔素萍,王晓燕.条锈菌诱导的小麦β-1,3-葡聚糖酶基因编码区的克隆及原核表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2007,35(6):125-129.
作者姓名:刘 博  崔素萍  王晓燕
作者单位:1. 西北农林科技大学,植保学院,陕西,杨凌,712100
2. 陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西,杨凌,712100
3. 西北农林科技大学,植保学院,陕西,杨凌,712100;陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西,杨凌,712100
基金项目:教育部科技计划;教育部长江学者和创新团队发展计划
摘    要:为研究小麦与条锈菌互作过程中β-1,3-葡聚糖酶基因的功能,根据小麦β-1,3-葡聚糖酶cDNA全长序列设计合成引物,通过RT-PCR方法获得小麦β-1,3-葡聚糖酶基因编码区,将其克隆至pGEM T-easy Vector,经HindⅢ和BamHⅠ双酶切回收目的片断,并将其定向克隆到pET-32a(+)Vector中构建表达载体GLU-pET-32a(+),转化E.coliBL21(DE3),用IPTG进行诱导表达。结果表明,小麦β-1,3-葡聚糖酶基因在大肠杆菌中得到了高效表达,获得了分子量约为49 ku的融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的19%。最佳诱导条件为:0.3 mmol/LIPTG,37℃诱导4 h。

关 键 词:条锈菌  小麦  β-1  3-葡聚糖酶基因  克隆  原核表达
文章编号:1671-9387(2007)06-0125-05
收稿时间:2006/5/15 0:00:00
修稿时间:2006-05-15

Cloning and prodaryotic expression of a wheat β-1,3-glucanase gene induced by Puccinia striiformis Westend f. sp tritici Eriks in E. coli
LIU Bo,CUI Su-ping,WANG Xiao-jie,HUANG Li-li,KANG Zhen-sheng.Cloning and prodaryotic expression of a wheat β-1,3-glucanase gene induced by Puccinia striiformis Westend f. sp tritici Eriks in E. coli[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2007,35(6):125-129.
Authors:LIU Bo  CUI Su-ping  WANG Xiao-jie  HUANG Li-li  KANG Zhen-sheng
Institution:1,2 (1 College of Plant Protection,Northwest A & F University,Yangling,Shaanxi 712100,China; 2 Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:
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