| 副溶血弧菌与嗜水气单胞菌双重PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 许佳乐,陈忠伟,陈婷婷,许艺兰,全琛宇,卢冰霞,林森,梁盼,曾家家,江新华,秦毅斌,黄广杰,何颖,欧阳康.副溶血弧菌与嗜水气单胞菌双重PCR检测方法的建立[J].中国动物检疫,2023,40(5):102-106. |
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| 作者姓名： | 许佳乐 陈忠伟 陈婷婷 许艺兰 全琛宇 卢冰霞 林森 梁盼 曾家家 江新华 秦毅斌 黄广杰 何颖 欧阳康 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学动物科学技术学院,动物传染病与分子免疫学实验室;2. 广西壮族自治区兽医研究所,农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室;3. 广西壮族自治区贵港市水产技术推广站 |
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| 基金项目： | 广西重点研发计划项目（桂科AB21076008，桂科AB20297059）；贵港市科学研究与技术开发计划项目（贵科计2117005）；玉林市科学研究与技术开发计划项目（玉市科20220519）；广西农业科技自筹经费项目（Z202226，Z202224）；广西基本科研业务费（桂科专项21-4） |
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| 摘 要： | 为建立一种可精准、快捷鉴别检测副溶血弧菌(VP)及嗜水气单胞菌(AH)的方法，根据GenBank公布的VP Tlh基因及AH aerA基因保守区序列，设计合成两对特异性引物，通过优化反应体系及反应程序，成功建立了一种可同时检测VP与AH的双重PCR方法，并开展了特异性及敏感性试验。结果显示：VP Tlh和AH aerA基因扩增条带大小分别为500、760 bp；反应体系中Tlh与aerA基因引物最优浓度分别为7.5、10.0nmol/L，反应程序中最佳退火温度为56.8℃；该方法对VP、AH的最低可检出细菌浓度均为1.2×103 CFU/mL；对地衣芽孢杆菌、微小杆菌、巨大芽孢杆菌、蜡阳芽孢杆菌、普通变形杆菌、维氏气单胞菌、布氏柠檬酸杆菌、豚鼠气单胞菌、霍乱弧菌、拟态弧菌、简氏气单胞菌等其他非目标菌均无交叉反应，仅对VP和AH呈特异性阳性扩增。综上，本研究建立了一种可快速鉴别诊断VP、AH的双重PCR检测方法，其特异性强、灵敏度高，可为VP、AH等细菌性病原引发的水生动物疫病的快速诊断、监测及有效防控提供技术支持。
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| 关 键 词： | 双重PCR 副溶血弧菌 嗜水气单胞菌 Tlh基因 aerA基因 快速诊断 |
Establishment of a Dual PCR for Vibrio parahaemolyticus and Aeromonas hydrophila |
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| Xu Jiale,Chen Zhongwei,Chen Tingting,Xu Yilan,Quan Chenyu,Lu Bingxi,Lin Sen,Liang Pan,Zeng Jiaji,Jiang Xinhu,Qin Yibin,Huang Guangjie,He Ying,Ouyang Kang.Establishment of a Dual PCR for Vibrio parahaemolyticus and Aeromonas hydrophila[J].China Journal Of Animal Quarantine,2023,40(5):102-106. |
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| Authors: | Xu Jiale Chen Zhongwei Chen Tingting Xu Yilan Quan Chenyu Lu Bingxi Lin Sen Liang Pan Zeng Jiaji Jiang Xinhu Qin Yibin Huang Guangjie He Ying Ouyang Kang |
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