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芦笋ISSR反应体系的建立及优化
引用本文:陈河龙,高建明,张世清,习金根,郑金龙,黄兴,易克贤.芦笋ISSR反应体系的建立及优化[J].分子植物育种,2018(1).
作者姓名:陈河龙  高建明  张世清  习金根  郑金龙  黄兴  易克贤
作者单位:中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所;
摘    要:通过正交试验建立芦笋ISSR优化反应体系,并对其反应程序进行优化。实验结果表明,优化的扩增体系:25μL的反应体系中含150 ng的模板DNA、0.3μmol/L引物、15μL 2×Mastermix;优化的反应程序:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,设定温度退火60 s,72℃延伸45 s,循环30次;然后72℃延伸10 min,4℃保存;筛选到了21条引物并确定其最优退火温度。实验结果为芦笋资源遗传多样性评价的研究奠定基础。

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