首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
     检索      

苦瓜ISSR-PCR反应体系的建立与优化
引用本文:林珲,汪伟裁,李大忠,薛珠政,李永平,张前荣,康玉妹,温庆放.苦瓜ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J].分子植物育种,2018(4).
作者姓名:林珲  汪伟裁  李大忠  薛珠政  李永平  张前荣  康玉妹  温庆放
作者单位:福建省农业科学院蔬菜研究中心;福建省农业科学院作物研究所;福建省蔬菜工程技术研究中心
摘    要:为建立适合于苦瓜的ISSR反应体系,为后续苦瓜的遗传多样性分析和亲缘关系鉴定奠定基础,本研究以"609"苦瓜品种作为模板DNA,试验采用单因素试验设计对影响反应体系的DNA模板、引物、d NTP和Taq酶的含量进行优化,并对单因素结果进行L9(33)正交试验设计。研究结果表明,苦瓜ISSR:20μL最佳反应体系为:2μL的10×Buffer(含Mg2+),30 ng模板DNA,0.25 mmol/L的d NTP,0.5μmol/L的引物,1.25 U的Taq DNA聚合酶。在此基础上,对优化引物的退火温度,确定最适宜的退火温度。验证优化的最佳反应体系,选用引物cw39132对48个苦瓜品种进行所确立扩增体系的验证,结果显示扩增产物条带清晰明亮、多态性丰富,且特异性强和重复性好,表明本研究所确定的反应体系适用于苦瓜的ISSR分子标记。

本文献已被 CNKI 等数据库收录!
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号