山羽藓ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选 |
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引用本文: | 麻扬,白学良,赵东平.山羽藓ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选[J].分子植物育种,2018(6). |
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作者姓名: | 麻扬 白学良 赵东平 |
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作者单位: | 内蒙古大学生命科学学院 |
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摘 要: | 本研究采用L16(45)正交试验设计法对山羽藓ISSR-PCR反应进行优化试验。研究结果表明,山羽藓ISSR-PCR最佳反应体系(25μL)为:Taq DNA聚合酶0.8 U,Mg2+1.5 mmol/L,d NTPs 0.4 mmol/L,引物0.6μmol/L和模板DNA 40 ng,对该反应体系的影响顺序为:Taq DNA聚合酶引物d NTPs模板DNAMg2+。同时筛选出12条适合山羽藓的ISSR引物,并确定了每条引物的最适退火温度。所建立的体系稳定可靠,条带清晰且多态性丰富,可为后续开展山羽藓种植资源、遗传多样性及分子亲缘地理学研究奠定基础。
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