甘蓝型油菜CONSTANS基因植物过表达载体构建及转基因植株的获得 |
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引用本文: | 郑本川,李浩杰,张锦芳,崔成,柴靓,蒋俊,伍先敏,蒋梁材.甘蓝型油菜CONSTANS基因植物过表达载体构建及转基因植株的获得[J].分子植物育种,2018(1). |
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作者姓名: | 郑本川 李浩杰 张锦芳 崔成 柴靓 蒋俊 伍先敏 蒋梁材 |
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作者单位: | 四川省农业科学院作物研究所;仲衍种业股份有限公司; |
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摘 要: | 甘蓝型油菜CONSTANS目的基因的克隆以NCBI上公布的序列设计全长扩增引物进行扩增。对目的基因片段测序并进行酶切位点分析,设计酶切引物(BamHⅠ,SacⅠ),通过BamHⅠ和SacⅠ双酶切将目的基因片段连接在真核表达载体pBI121上,PCR鉴定结果表明PBI121+CONSTANS过表达载体已成功构建。将过表达载体转化感受态EHA105细胞,通过拟南芥花絮侵染T0代种子,用含卡拉霉素(50 mg/L)的MS固体培养基进行筛选,获得阳性植株。通过PCR鉴定,结果表明PBI121+CONSTANS过表达载体已成功导入拟南芥中,获得转基因阳性苗12株,为下一步基因功能分析做好了准备。
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