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引起浙贝母黑斑病的交链格孢单抗及检测试纸条的制备
引用本文:温思思,赵福运,郭飘逸,徐云飞,赵伟春.引起浙贝母黑斑病的交链格孢单抗及检测试纸条的制备[J].植物保护,2022,48(5):227-233.
作者姓名:温思思  赵福运  郭飘逸  徐云飞  赵伟春
作者单位:浙江中医药大学, 杭州 310053
基金项目:浙江省基础公益研究计划(LGN21C140004, 2015C32076); 浙江省中医药科技计划(2020B060)
摘    要:浙贝母黑斑病是危害浙贝母茎叶的重要真菌性病害之一, 该病侵染叶片产生叶斑?叶枯, 严重时全株枯死?本研究制备了针对浙贝母黑斑病致病菌交链格孢Alternaria alternata的单克隆抗体(单抗), 并开发了胶体碳免疫层析试纸条用于黑斑病早期精准检测?以交链格孢提取液免疫Bal b/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备单抗, 间接ELISA法和Western blot分析单抗的效价?灵敏度?特异性?抗体类型及结合蛋白?以双抗夹心法制备胶体碳免疫层析试纸条?得到3种针对交链格孢的单抗及其杂交瘤细胞株AaA1?AaC2和AaC5?3种单抗对交链格孢均具有高度特异性, 灵敏度为12.21~24.41 ng/mL, 效价≥6.40×105, 抗体类型分别为IgG2a?IgG3和IgG3, 结合蛋白的分子量分别为37?62 kDa和66 kDa?以AaA1为碳标单抗, AaC2为划膜单抗的胶体碳试纸条检测交链格孢的方法快速简便?准确灵敏?经济环保?从田间采样到出结果用时少于15 min, 样品简单研磨后取汁液加入加样孔即完成全部操作, 对交链格孢抗原的检测灵敏度为6.25 μg/mL, 试纸条采用环保材料制备, 单个试纸条的成本约1.7元?

关 键 词:浙贝母    黑斑病    交链格孢    单克隆抗体    试纸条
收稿时间:2021/8/8 0:00:00
修稿时间:2021/11/8 0:00:00

Preparation of monoclonal antibody and test strips for Alternaria alternata causing black spot disease of Fritillaria thunbergii
WEN Sisi,ZHAO Fuyun,GUO Piaoyi,XU Yunfei,ZHAO Weichun.Preparation of monoclonal antibody and test strips for Alternaria alternata causing black spot disease of Fritillaria thunbergii[J].Plant Protection,2022,48(5):227-233.
Authors:WEN Sisi  ZHAO Fuyun  GUO Piaoyi  XU Yunfei  ZHAO Weichun
Institution:Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China
Abstract:
Keywords:Fritillaria thunbergii  black spot disease  Alternaria alternata  monoclonal antibody (McAb)  test strip
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