| 鹅圆环病毒重组核衣壳蛋白的原核表达 |
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| 引用本文： | 余旭平,胡东建,郑新添,竺春,刘晓宁,于洪涛.鹅圆环病毒重组核衣壳蛋白的原核表达[J].中国预防兽医学报,2008,30(7). |
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| 作者姓名： | 余旭平 胡东建 郑新添 竺春 刘晓宁 于洪涛 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学动物预防医学研究所,浙江杭州,310029
2. 龙岩学院生物科学与工程系,福建龙岩,364000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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浙江省科技计划 |
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| 摘 要： | 根据已发表的鹅圆环病毒GoCV-yk1株的序列,设计引物扩增出全长核衣壳蛋白基因（Cap）,用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21（DE3）进行融合表达,经SDS-PAGE电泳检测未见到目的蛋白条带。应用生物信息学分析确定Cap蛋白的核定位信号区域,新设计一对引物扩增出不包含核定位信号序列编码区的核衣壳蛋白基因,将截短Cap基因克隆入pET-28a进行融合表达,经SDS-PAGE电泳和Western blot检测,截短Cap蛋白获得了高效表达,融合蛋白的分子量约为27.6ku,表达产物以包涵体形式存在,其表达量可以达菌体总蛋白的18.3%。截短Cap蛋白的高效表达为鹅圆环病毒ELISA检测方法的建立和进一步开展GoCV致病性及其免疫机制的探索奠定了基础。
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| 关 键 词： | 鹩 圆环病毒 核衣壳蛋白基因 核定位信号 原核表达 病毒 重组核衣壳蛋白 原核表达 goose protein recombinant Expression system 免疫机制 致病性 检测方法 ELISA 总蛋白 菌体 表达量 存在 包涵体 分子量 融合蛋白 高效表达 |
Expression of the recombinant capsid protein of goose circovirus in E.coli system |
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| YU Xu-ping,HU Dong-jian,ZHENG Xin-tian,ZHU Chun,LIU Xiao-ning,YU Hong-tao.Expression of the recombinant capsid protein of goose circovirus in E.coli system[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(7). |
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| Authors: | YU Xu-ping HU Dong-jian ZHENG Xin-tian ZHU Chun LIU Xiao-ning YU Hong-tao |
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