鸭坦布苏病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量检测方法的建立 |
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引用本文: | 万春和,朱海侠,施少华,黄瑜,程龙飞,傅光华,陈红梅.鸭坦布苏病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量检测方法的建立[J].中国兽医学报,2013,33(7). |
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作者姓名: | 万春和 朱海侠 施少华 黄瑜 程龙飞 傅光华 陈红梅 |
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作者单位: | 福建省农业科学院 畜牧兽医研究所 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建 福州,350013 |
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基金项目: | 现代农业产业体系建设专项资金资助项目,公益性行业(农业)科研专项,福建省种业创新与产业化工程项目,公益类科研院所专项,福建省自然科学基金资助项目,福建省农业科学院创新团队项目 |
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摘 要: | 根据鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DFV) NS5基因序列特征设计引物,建立基于SYBR Green Ⅰ检测模式的实时荧光定量RT-PCR(real-time RT-PCR,RRT-PCR),该方法检测DFV NS5基因2.74×103~2.74×10 7拷贝/μL反应范围内有很好的线性关系.扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(86.23±0.18)℃,对禽流感病毒、鸭肝炎病毒、鸭源禽1型副黏病毒、鸭减蛋综合征病毒、番鸭呼肠孤病毒核酸均无阳性信号扩增,可重复性好,组内变异系数为0.52%~1.48%,组间变异系数0.71%~2.21%.检测速度快,从样本处理到报告结果仅需4h.
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关 键 词: | 鸭坦布苏病毒 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量RT-PCR |
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