羊痘病毒多表位核酸疫苗的构建及表达 |
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引用本文: | 陈轶霞,刘俊林,王明明,余继英,骆学农. 羊痘病毒多表位核酸疫苗的构建及表达[J]. 中国兽医学报, 2013, 33(8) |
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作者姓名: | 陈轶霞 刘俊林 王明明 余继英 骆学农 |
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作者单位: | 1. 西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州,730030 2. 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃兰州,730046 |
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基金项目: | 西北民族大学中央高校基本科研业务费专项资金资助项目,家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放课题资助项目,国家自然科学基金资助项目 |
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摘 要: | 结合文献报道并通过计算机软件分析筛选出羊痘病毒(SGPV) A4同源核蛋白和A27、A33、B5、L1同源膜蛋白基因的T、B细胞优势抗原表位共6段,采用人工合成的方法将各抗原表位以柔性氨基酸(GPGPG)作为接头串联成一条全新的多表位嵌合基因E.将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,采用酶切分析与序列测定方法筛选鉴定阳性重组质粒,构建pcDNA3.1-E质粒.用脂质体法转染BHK-21细胞,通过间接免疫荧光(IFA)试验验证其表达效果;提取转染细胞总RNA,RT-PCR方法检测目的基因的转录.结果所构建的真核表达质粒在BHK-21细胞中能表达目的蛋白,RT-PCR方法检测到目的基因的转录;表明表达产物能与相应抗体特异性结合,具有一定的生物学活性和抗原性,有望成为抗SGPV的核酸疫苗.
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关 键 词: | 羊痘病毒 多表位 核酸疫苗 真核表达 |
Construction and expression of eukaryotic vectors based on goat pox virus multi-epitope chimeric gene |
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Abstract: | |
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Keywords: | sheeppox virus and goatpox virus (SGPV) multi-epitope chimeric gene eukaryotic expression |
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