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| 利用SYBR Green real-time PCR方法监控鸡外周血淋巴细胞中马立克病毒的载量 | |
| 引用本文： | 金元昌,韦平,袁志栋,李玉峰. 利用SYBR Green real-time PCR方法监控鸡外周血淋巴细胞中马立克病毒的载量[J]. 中国兽医学报, 2013, 33(8) |
| 作者姓名： | 金元昌 韦平 袁志栋 李玉峰 |
| 作者单位： | 1. 湖南科技大学生命科学学院,湖南湘潭411201;广西大学养禽与禽病研究所,广西南宁530004 2. 广西大学养禽与禽病研究所,广西南宁,530004 3. 湖南科技大学生命科学学院,湖南湘潭,411201 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目,湖南省自然科学基金资助项目,湖南省教育厅一般资助项目,湖南科技大学博士启动基金资助项目 |
| 摘 要： | 建立基于SYBR Green Ⅰ的real-time FQ-PCR方法检测并定量鸡外周血淋巴细胞(peripheral blood leukocytes,PBLs)中马立克病毒(Marek's disease virus,MDV)的载量(以meq基因为定量标准),并将此技术的敏感性与标准PCR方法进行对比.应用PCR技术从MDV-1攻毒后的霞烟鸡PBLs中扩增MDV meq基因的部分片段,纯化上述基因的DNA扩增产物,然后克隆到pGM-T载体,重组质粒通过PCR和EcoR Ⅰ酶切及测序分析进行确认;将浓度梯度的meq基因的重组标准品质粒DNA进行real-time FQ-PCR,建立其相应的标准曲线.同样以质粒DNA为模板,real-time FQ-PCR方法的最低检出率为10拷贝,而标准PCR的最低检出率则为32拷贝.结果表明,在检测MDV时,real-time FQ-PCR敏感度比标准PCR要高. |
| 关 键 词： | 马立克病毒 外周血淋巴细胞 real-time FQ-PCR meq基因 |
Monitoring Marek's disease virus load in peripheral blood leukocytes of chicken using SYBR Green real-time PCR |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Marek's disease virus (MDV) peripheral blood leukocytes (PBLs) real-time FQ-PCR meq gene |
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