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分子信标荧光定量PCR检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立
引用本文:禹思宇,周宇,唐连飞,孟芳,袁晓芬,梁斌. 分子信标荧光定量PCR检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立[J]. 中国动物检疫, 2015, 32(7): 67-71
作者姓名:禹思宇  周宇  唐连飞  孟芳  袁晓芬  梁斌
作者单位:1. 湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心,湖南长沙,410004
2. 惠州出入境检验检疫局,广东惠州,516006
基金项目:国家质检总局科技资助项目(2014IK243)
摘    要:利用新型荧光探针—分子信标,建立一种检测猪流感病毒的新方法。根据H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的HA和NA基因的保守基因序列,分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针,利用实时荧光定量PCR技术检测H3N2亚型SIV。构建重组质粒pSK-H3和pSK-N2并绘制标准曲线。结果显示,该检测方法的敏感性达到102拷贝/μL;与其它主要相关病毒均不发生交叉反应,批内和批间试验的重复性变异系数(CV)均小于3%,表明该方法灵敏度强、特异性好。此方法的建立将为流感病毒H3N2亚型定型检测提供一种快速有效的方法。

关 键 词:猪流感病毒  H3N2亚型  分子信标探针  实时荧光定量PCR

Establishment of a Molecular Beacon Real Time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detection of Swine Influenza Virus H3N2 Subtype
Yu Siyu,Zhou Yu,Tang Lianfei,Meng Fang,Yuan Xiaofen,Liang Bin. Establishment of a Molecular Beacon Real Time Fluorescent Quantitative PCR Assay for Detection of Swine Influenza Virus H3N2 Subtype[J]. China Animal Health Inspection, 2015, 32(7): 67-71
Authors:Yu Siyu  Zhou Yu  Tang Lianfei  Meng Fang  Yuan Xiaofen  Liang Bin
Abstract:
Keywords:swine influenza virus  H3N2 subtype  molecular beacon probe  real-time fluorescent quantitative PCR
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