| 猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 单晶晶,陈天慧,于红欣,王立娇,周双海.猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR检测方法的建立[J].北京农学院学报,2016,31(1):60-63. |
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| 作者姓名： | 单晶晶 陈天慧 于红欣 王立娇 周双海 |
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| 作者单位： | 北京农学院动物科学技术学院,北京,102206;北京农学院动物科学技术学院,北京102206;北京市房山区动物疫病预防控制中心,北京102400 |
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| 基金项目： | 北京市农委“菜篮子”能力提升工程项目 |
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| 摘 要： | 目的]建立一种定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的荧光定量PCR方法.方法]用RT-PCR方法扩增PRRSV的N基因片段,构建含有N基因片段的重组质粒,以不同浓度的PRRSV-N基因重组质粒作为模板来进行检测PRRSV的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR扩增.结果]PRRSV SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR的扩增效率为98.2％,标准曲线的决定系数为0.9995,可准确检测的最低核酸模板浓度为60 copies/μL,重复性试验的变异系数小于3％,对3种常见的猪源RNA病毒的检测结果全为阴性.临床检测显示,PRRS病猪的血清中PRRSV载量极显著(P＜0.01)高于PRRSV亚临床感染猪.结论]建立了一种可用于PRRSV定量检测与PRRS早期快速诊断的特异性强、灵敏度高、重复性好的PRRSV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法.
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 SYBR Green Ⅰ 荧光定量PCR |
Development of a fluorescent quantitative PCR assay for porcine reproductive and respiratory syndrome virus |
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| SHAN Jingjing,CHEN Tianhui,YU Hongxin,WANG Lijiao,ZHOU Shuanghai.Development of a fluorescent quantitative PCR assay for porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Journal of Beijing Agricultural College,2016,31(1):60-63. |
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| Authors: | SHAN Jingjing CHEN Tianhui YU Hongxin WANG Lijiao ZHOU Shuanghai |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PRRSV SYBR Green Ⅰ fluorescent quantitative PCR |
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