RNA干扰用siRNA的体外转录合成 |
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引用本文: | 孟和,陈学辉,潘玉春.RNA干扰用siRNA的体外转录合成[J].上海交通大学学报(农业科学版),2004,22(1):64-68. |
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作者姓名: | 孟和 陈学辉 潘玉春 |
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作者单位: | 上海交通大学,农业与生物学院,上海,201101 |
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基金项目: | 国家973计划“SARS防治基础研究”专项基金(2003CB514129),中国博士后科学基金(2003034267)资助项目 |
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摘 要: | RNA干扰(RNA interference,RNAi)作为一种特异性沉默基因表达的方法,正在成为研究基因功能、胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具,而获得符合干扰要求的短双链干扰RNA(small interference RNA,siRNA)是进行RNA;研究的首要步骤。本研究建立了体外转录合成siRNA方法。并用其生成的siRNA干扰鸡成纤维细胞外源绿荧光蛋白(GFP)基因和内源3—磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的表达。结果显示,siRNA能特异性降低鸡成纤维细胞中内外源基因的表达。本实验认为这种以DNA为模板体外转录合成siRNA方法操作简单、成本低、产物得率高,值得从事RNA研究者参考借鉴。
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关 键 词: | RNA干扰 RNAi 特异性沉默基因表达 短双链干扰RNA siRNA 鸡成纤维细胞 GFP GAPDH 体外转录合成 |
文章编号: | 1671-9964(2004)01-0064-05 |
修稿时间: | 2003年10月21 |
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