猪瘟病毒兔化弱毒株5’端调控序列及P23基因的扩增与克隆 |
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作者姓名: | 李红卫 涂长春 金扩世 章金钢 王新平 殷震 |
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作者单位: | 农牧大学军事兽医研究所 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,国家“863”计划资助 |
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摘 要: | 从猪瘟病毒兔化弱毒株(HCLV)的细胞培养液中直接提取RNA,同时根据猪瘟病毒Alfort株的基因组序列化学合成了6条引物,应用“半巢式”PCR方法扩增了HCLV两个cD-NA片段,其大小与推算的长度相符,依次为693bn和276bp。这2个片段包括了HCLV基因组5’端非编码区调控序列,编码具有蛋白酶活性的P23蛋白的基因和编码大部分核衣壳蛋白P14的基因。最后,按标准方法将这2个cDNA片段克隆到pUC18的SmaI切点。
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关 键 词: | 猪瘟病毒兔化弱毒株,基因,“半巢式”PCR,克隆 |
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