新型番鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其抗原特性 |
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引用本文: | 陈海鹏,云涛,张存,余斌,倪征,华炯钢,崔言顺.新型番鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其抗原特性[J].浙江农业学报,2014,26(6):1448. |
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作者姓名: | 陈海鹏 云涛 张存 余斌 倪征 华炯钢 崔言顺 |
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作者单位: | (1 山东农业大学 动物科技学院,山东 泰安 271018;2.浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所,浙江 杭州310021) |
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基金项目: | 公益性行业(农业)科研专项经费(201003012);国家自然科学基金(31302121);浙江省自然科学基金(LY13C180002);浙江省公益性项目(2012C22074);浙江省重大动物传染病防治科技创新团队项目(2012R1003104) |
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摘 要: | 新型番鸭呼肠孤病毒是近年来新发现的一种引起鸭严重疾病的病原,该病毒与经典MDRV主要在病毒宿主范围、体外培养特性、临床致病性和免疫保护特性上存在显著的差异。通过RT\|PCR扩增新型呼肠孤病毒σC基因,经NcoⅠ和XhoⅠ双酶切处理,插入到pET\|28a(+)原核表达载体,获得重组质粒pET\|28a(+)\|σC。将重组阳性质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达后经SDS\|PAGE电泳对σC蛋白进行初步分析,蛋白分子量约为36 kDa。重组蛋白经纯化后免疫实验兔,获得抗σC蛋白的高效免疫血清。通过Western Blot与间接免疫荧光实验初步表明,新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白具有良好的反应活性。
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关 键 词: | 新型呼肠孤病毒 σC基因 原核表达 兔抗血清 |
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