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新型番鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其抗原特性
引用本文:陈海鹏,云涛,张存,余斌,倪征,华炯钢,崔言顺.新型番鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其抗原特性[J].浙江农业学报,2014,26(6):1448.
作者姓名:陈海鹏  云涛  张存  余斌  倪征  华炯钢  崔言顺
作者单位:(1 山东农业大学 动物科技学院,山东 泰安 271018;2.浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所,浙江 杭州310021)
基金项目:公益性行业(农业)科研专项经费(201003012);国家自然科学基金(31302121);浙江省自然科学基金(LY13C180002);浙江省公益性项目(2012C22074);浙江省重大动物传染病防治科技创新团队项目(2012R1003104)
摘    要:新型番鸭呼肠孤病毒是近年来新发现的一种引起鸭严重疾病的病原,该病毒与经典MDRV主要在病毒宿主范围、体外培养特性、临床致病性和免疫保护特性上存在显著的差异。通过RT\|PCR扩增新型呼肠孤病毒σC基因,经NcoⅠ和XhoⅠ双酶切处理,插入到pET\|28a(+)原核表达载体,获得重组质粒pET\|28a(+)\|σC。将重组阳性质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达后经SDS\|PAGE电泳对σC蛋白进行初步分析,蛋白分子量约为36 kDa。重组蛋白经纯化后免疫实验兔,获得抗σC蛋白的高效免疫血清。通过Western Blot与间接免疫荧光实验初步表明,新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白具有良好的反应活性。

关 键 词:新型呼肠孤病毒  σC基因  原核表达  兔抗血清    
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