| 犬细小病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用 |
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| 引用本文： | 刘海防,胡传伟,谢之景,姜世金,张兴晓,倪长鹏,贾赟,杨笃宝. 犬细小病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用[J]. 中国兽医学报, 2010, 30(5) |
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| 作者姓名： | 刘海防 胡传伟 谢之景 姜世金 张兴晓 倪长鹏 贾赟 杨笃宝 |
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| 作者单位： | 1. 山东农业大学动物科学院,山东泰安,271018
2. 辽宁出入境检验检疫局技术中心,辽宁大连,116001 |
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| 基金项目： | 山东农业大学青年科技创新基金资助项目(23204); 国家质检总局基金资助项目(2005IK047) |
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| 摘 要： | 根据GenBank中CPV VP2蛋白基因序列,选择CPV VP2基因保守序列,分别设计1对特异性引物和TaqMan探针,建立了CPV Taq Man荧光定量PCR检测方法。对CPV Taq Man荧光定量PCR的反应体系和反应条件进行优化,并对其特异性和敏感性进行了测定,建立标准曲线。结果,CPV Taq Man荧光定量PCR对CPV检测阳性,并能对10拷贝/μL的CPV模板检测阳性,标准曲线的相关系数为0.9992,但对非CPV模板检测阴性。结果表明,所建立的CPV Taq Man荧光定量PCR具有很好的特异性和敏感性,标准曲线具有很强的实用性。同时对CPV Taq Man荧光定量PCR与CPV PCR进行了比较试验,结果前者比后者的敏感性高100倍。采用CPVHA、CPV PCR与CPV Taq Man荧光定量PCR对55份临床样品进行检测,CPV HA对30份样品检测阳性,CPVPCR对40份样品检测阳性,CPV Taq Man荧光定量PCR对47份样品检测阳性。这表明,CPV Taq Man荧光定量PCR对样品的检出率最高,具有特异、敏感、快速的特点,适用临床样品的检测。
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| 关 键 词： | 犬细小病毒 实时定量PCR Taq Man荧光探针 |
Establishment and preliminary application of a Taq Man-based real-time PCR method for detection of canine parvovirus |
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| LIU Hai-fang,HU Chuan-wei,XIE Zhi-jing,JIANG Shi-jin,ZHANG Xing-xiao,NI Chang-peng,JIA Yun,YANG Du-bao. Establishment and preliminary application of a Taq Man-based real-time PCR method for detection of canine parvovirus[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2010, 30(5) |
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| Authors: | LIU Hai-fang HU Chuan-wei XIE Zhi-jing JIANG Shi-jin ZHANG Xing-xiao NI Chang-peng JIA Yun YANG Du-bao |
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| Affiliation: | LIU Hai-fang1,HU Chuan-wei2,XIE Zhi-jing1,JIANG Shi-jin1,ZHANG Xing-xiao1,NI Chang-peng2,JIA Yun2,YANG Du-bao1 (1.Animal Science , Technology Institule,Sh,ong Agricultural University,Taian,Sh,ong 271018,China,2.Liaoning Entry-Exit Inspection , Quarantine Bureau,Dalian,Liaoning 116001,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | canine parvovirus real-time PCR Taq Man fluorescence probe |
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