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基于α-半乳糖苷酶基因为筛选标记的酿酒酵母诱导型表达载体的构建及应用
作者姓名:张伟  郭钦  阮辉  何国庆
作者单位:温州医学院基础医学院;江苏大学食品学院;浙江大学生物系统工程与食品科学学院
基金项目:国家高技术研究发展计划“863”资助项目(2006AA10Z316);浙江省温州市科技局资助项目(Y20080034)
摘    要:以α-半乳糖苷酶基因为筛选标记,构建GAL1诱导型启动子介导的酿酒酵母表达载体YGM-α-gal质粒,将枯草芽孢杆菌的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆到此载体中,构建质粒YGMPA-α-gal,转化宿主酵母后,实现β-1,3-1,4-葡聚糖酶在酿酒酵母中的分泌表达.结果表明:在2%半乳糖诱导下,摇瓶发酵24h后分泌表达的β-葡聚糖酶活性达到411.9U爛mL-1,而在培养60h后,发酵液中α-半乳糖苷酶活性可达64.2U爛mL-1.说明α-半乳糖苷酶基因可用作酿酒酵母表达载体转化的有效筛选标记,为食品级酿酒酵母表达系统的构建提供了新选择.

关 键 词:α-半乳糖苷酶基因  筛选标记  酿酒酵母  β-1,3-1,4-葡聚糖酶
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