易错PCR对扩展青霉脂肪酶基因PEL的定向进化 |
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引用本文: | 陈彦,司圣乾,刘燕雅,冯蔚宗,林琳.易错PCR对扩展青霉脂肪酶基因PEL的定向进化[J].安徽农学通报,2011,17(5):22-24. |
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作者姓名: | 陈彦 司圣乾 刘燕雅 冯蔚宗 林琳 |
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作者单位: | 福建师范大学生命科学学院,福建福州,350108 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目,福建自然科学基金重点资助项目,福建自然科学基金资助项目,福建省科技平台建设计划项目 |
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摘 要: | 以带有野生型扩展青霉碱性脂肪酶eDNA全长的载体psk—lip07为模板,利用易错PCR技术以及高通量筛选,最终获得了一株最佳突变体CS—pPIC3.5K—lip07-ER04,其最适作用温度比野生型提高10℃,酶活提高了约22%,热稳定性Tm值也提高了3.28%。基因测序结果表明,脂肪酶(PEL)第82位的Lys突变成Arg,第241位的Glu突变成Pro。
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关 键 词: | 扩展青霉脂肪酶 易错PCR 最适作用温度 酶活 热稳定性 |
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