猕猴桃 AcNPR1基因克隆及抗病响应表达分析

为探究猕猴桃 AcNPR1基因在抗病响应中的作用及其在不同抗性猕猴桃品种间抗性差异机制，以高感病品种‘红阳’和抗病品种‘徐香’猕猴桃叶片为材料克隆 AcNPR1基因序列；利用ExPASy-ProtParam tool、MEGA 7.0 等对‘红阳’AcNPR1蛋白的理化性质进行分析、亚细胞定位进行预测、进化关系等进行分析；通过RT-qPCR分析 AcNPR1基因在不同品种猕猴桃植株中的组织表达模式以及病原菌和水杨酸（Salcylic acid，SA）对其诱导表达模式。结果表明， AcNPR1基因开放阅读框1 770 bp（Genbank 登录号MW881148），编码589个氨基酸，理论等电点6.27，具有典型的BTB/POZ结构域、ANK重复序列、NPR-like等NPR1蛋白保守结构域，AcNPR1蛋白预测定位于细胞核中；蛋白质的二级结构以α螺旋和无规卷曲为主；系统进化显示其与茶树的亲缘关系最为密切，相似性为83.94%。组织特异性分析表明 AcNPR1基因在‘红阳’和‘徐香’品种叶片中的表达水平最高。在丁香假单胞杆菌猕猴桃致变种（Pseudomonas syringae pv.actinidiae，Psa）处理下，抗病品种‘徐香’ AcNPR1基因的相对表达水平在处理0 h后迅速增加，为对照的3.6倍；而高感品种‘红阳’在48 h后显著增加，为对照的2.7倍。在SA+Psa处理下，‘徐香’ AcNPR1基因相对表达水平在24 h内达到最高水平，是对照的7.7倍；‘红阳’在72 h后达到最大值，仅为对照的1.6倍。 ‘徐香’ AcNPR1基因的抗病响应反应早于‘红阳’且更易受SA诱导表达。 AcNPR1基因在猕猴桃抗病胁迫方面具有一定作用，在不同抗性的猕猴桃品种抗病机制中存在差异。

Cloning of AcNPR1 Gene in Kiwifruit and Expression Analysis of Disease Resistance Response