| (木奈)嫩芽总RNA的提取与纯化 |
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| 引用本文： | 陈桂信,吕柳新,赖钟雄,潘东明.(木奈)嫩芽总RNA的提取与纯化[J].江西农业大学学报,2004,26(3). |
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| 作者姓名： | 陈桂信 吕柳新 赖钟雄 潘东明 |
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| 基金项目： | 引进国际先进农业科技计划(948计划)，福建省科技厅科研项目，福建省教育厅科研项目 |
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| 摘 要： | 以嫩芽为材料,对Trizol法进行改进提取总RNA,试验结果表明,加入10%PVPP与材料共研磨,并在Trizol提取液中加入1%β-巯基乙醇,可以完全排除酚类物质、色素等杂质的干扰;采用在匀浆液中加入终浓度为20%乙醇沉淀多糖、在裂解液抽提的上相中加入终浓度为3 mol/LLiCl沉淀RNA、在RNA的粗提液中加入适量的3 mol/LNaAc(pH5.2)和低浓度的无水乙醇沉淀多糖等方法相结合,可以有效地去除多糖的干扰,获得纯净、完整的RNA样品,用它为模板进行RT-PCR反应,获得PPO基因保守区约600～800 bp的cDNA条带;而单独采用在匀浆液中加入终浓度为20%乙醇沉淀多糖的方法,不能将样品中的多糖去除干净,这些残留的多糖会抑制逆转录酶的活性,导致逆转录反应的失败.
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| 关 键 词： | (木奈) 总RNA 提取与纯化 |
Extraction and purification of total RNA from young buds of Nai(Prunus salicina Lindl.var.cordata) |
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