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禽成髓性白血病病毒p27和gag基因的克隆
引用本文:祝晓春,陈福勇,常建宇. 禽成髓性白血病病毒p27和gag基因的克隆[J]. 中国兽医杂志, 2001, 37(8): 8-10
作者姓名:祝晓春  陈福勇  常建宇
作者单位:1. 中国药品生物制品检定所北京崇文 100050
2. 中国农业大学北京海淀 100094
摘    要:禽成髓性白血病是由禽成髓性白血病病毒引起的一种禽白血病(Avian Leukosis)。禽成髓性白血病病毒的gag基因具有高度保守性,其编码的群特异性抗原p27是禽白血病病毒所共有的主要核心蛋白,可做为禽白血病的诊断抗原。本实验采用AMV感染鸡胚成纤维细胞(CEF),提取感染细胞总RNA,用随机引物反转录成cDNA,根据已经发表的AMV BAI-A株序列设计两对针对p27基因和gag基因的特异性引物,分别进行PCR,成功地扩出p27基因和gag基因,其片段分别为793bp和2.1Kb。以gag基因的PCR产物为模板,采用p27的特异性引物也成功扩出p27片段。分别将p27,gag基因与pGEM-TEasy载体进行连接,转化大肠杆菌,筛选阳性克隆,提取质粒,进行酶切鉴定。对含有p27基因的质粒进行测序,结果证明成功克隆了p27基因,间接证明了2.1Kb的片段是gag基因。p27和gag基因的成功克隆为该病的探针诊断和gag基因的表达提供了基础。

关 键 词:禽成髓性白血病病毒 gag基因 p27基因 RT-PCR 基因克隆
文章编号:0529-6005(2001)08-0008-03

Cloning of p27 and gag genes of avian myeloblastosis virus(AMV)
ZHU Xiao chun ,CHEN Fu yong ,CHANG Jian yu. Cloning of p27 and gag genes of avian myeloblastosis virus(AMV)[J]. Chinese Journal of Veterinary Medicine, 2001, 37(8): 8-10
Authors:ZHU Xiao chun   CHEN Fu yong   CHANG Jian yu
Affiliation:ZHU Xiao chun 1,CHEN Fu yong 2,CHANG Jian yu 2
Abstract:
Keywords:avian myeloblastosis virus  gag gene  p27 gene  RT PCR  gene clone
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