猪呼吸道病原菌多重PCR检测方法的建立及应用 |
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作者姓名: | 吴艳 黎娜铭 张宇鑫 张伟 陈穗莲 黄云 田永宽 曾智勇 吴学祥 王彬 |
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作者单位: | 1. 贵州大学动物科学学院 |
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基金项目: | 贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2020]1Y033号,黔科合支撑[2019]2276号); |
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摘 要: | 为建立一种快速诊断由猪链球菌(SS)、猪胸膜肺炎放线杆菌(App)、猪多杀性巴氏杆菌(Pm)、副猪嗜血杆菌(Hps)、猪支气管败血波氏杆菌(Bb)和猪肺炎支原体(Mhp)单独或混合感染引起的猪呼吸道疾病的检测方法,基于上述6种病原菌对应的gdh(SS)、apxⅣA(App)、KMT1(Pm)、16S rRNA(Hps)、fla(Bb)和p36 ldh(Mhp)基因设计特异性引物,通过优化各反应条件建立了能同时检测SS、App、Pm、Hps、Bb和Mhp的多重PCR方法。结果显示,该方法特异性强,仅对SS、App、Pm、Hps、Bb和Mhp有特异性扩增,对大肠埃希氏菌、奇异变形杆菌、停乳链球菌和金黄色葡萄球菌等其他病原菌的扩增结果均为阴性;敏感性较高,对6种病原菌DNA的最低检出限分别为SS 8.66×102拷贝/μL、App 1.05×104拷贝/μL、Pm 8.61×102拷贝/μL、Hps 9.01×102拷贝/μL、Bb 7.54×102拷贝/μL、Mhp 3.86×10...
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关 键 词: | 猪 呼吸道 病原菌 多重聚合酶链反应 |
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