| 猪TGEV HN-2012株ORF3a和ORF3b基因遗传变异分析及其真核表达研究 |
| |
| 引用本文： | 曹贝贝,兰培英,韩 丽,等.猪TGEV HN-2012株ORF3a和ORF3b基因遗传变异分析及其真核表达研究[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2016,44(4):10-16. |
| |
| 作者姓名： | 曹贝贝 兰培英 韩 丽 等 |
| |
| 作者单位： | 河南农业大学 牧医工程学院,河南农业大学 牧医工程学院；河南省动物性食品安全重点实验室,河南农业大学 牧医工程学院 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目“Ⅰ型干扰素在TGEV与树突状细胞相互作用中的免疫功能及调控机制研究”(31101796)；河南省基础与前沿技术研究计划项目“猪传染性胃肠炎病毒感染对ST细胞免疫生物学特性的影响”(112300410161) |
| |
| 摘 要： | 【目的】研究猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)HN-2012株ORF3a和ORF3b基因的遗传变异情况。【方法】根据GenBank公布的猪传染性胃肠炎病毒ORF3a和ORF3b基因序列,分别设计合成1对特异性引物,通过RTPCR从猪传染性胃肠炎病毒HN-2012株的cDNA中扩增ORF3a和ORF3b基因,经克隆测序后,将其基因序列与NCBI中不同来源的TGEV毒株的相应序列进行同源性分析,构建系统进化树并进行遗传变异分析,然后将ORF3a和ORF3b基因亚克隆至真核表达载体,构建pCAGGS-ORF3a-flag和pCAGGS-ORF3b-flag载体,转染293T细胞进行表达,利用flag标签抗体对2个基因的蛋白表达情况进行Western blot分析。【结果】TGEV HN-2012株的ORF3a基因与其他毒株间核苷酸的同源性为92.6%~100%,ORF3b基因与其他毒株间核苷酸的同源性为98.6%~99.7%。Western blot结果表明,ORF3a蛋白和ORF3b蛋白的分子质量约为8ku和28ku。【结论】TGEV HN-2012株的ORF3a基因与CH/JLY2/08、CH/HLJH/08株等亲缘关系较近,ORF3b基因与TS株、Miller M6株等亲缘关系较近,与我国其他毒株关系较远;成功实现了ORF3a和ORF3b蛋白在293T细胞中的表达。
|
| 关 键 词： | TGEV 河南分离株（HN-2012） ORF3a和ORF3b基因 293T细胞 真核表达 |
| 收稿时间： | 2014/8/14 0:00:00 |
Genetic variation and eukaryotic expression of ORF3a and ORF3b from porcine TGEV HN-2012 strain |
| |
| CAO Beibei,LAN Peiying and HAN Li,et al.Genetic variation and eukaryotic expression of ORF3a and ORF3b from porcine TGEV HN-2012 strain[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2016,44(4):10-16. |
| |
| Authors: | CAO Beibei LAN Peiying and HAN Li |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《西北农林科技大学学报(社会科学版)》下载免费的PDF全文 |
|
