鸭IFN-α成熟肽基因的原核表达、复性及其抗病毒活性研究 |
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引用本文: | 龚永强,程安春,汪铭书,杨梅,张瑶,陈斌,钟小容.鸭IFN-α成熟肽基因的原核表达、复性及其抗病毒活性研究[J].畜牧兽医学报,2008,39(12). |
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作者姓名: | 龚永强 程安春 汪铭书 杨梅 张瑶 陈斌 钟小容 |
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作者单位: | 1. 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,雅安,625014 2. 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,雅安,625014 3. 动物疫病与人类健康四川省重点实验室,雅安,625014 4. 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,雅安,625014;四川省兽医防疫总站,成都,610041 |
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基金项目: | 国家科技支撑计划,教育部科技创新工程重大项目培育基金,教育部新世纪优秀人才支持计划,四川省教育厅重点项目,四川省重点建设学科项目 |
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摘 要: | 为获得鸭α-干扰素(DuIFN—α)并研究其生物学功能,将DuIFN-α成熟蛋白基因与原核表达载体pET32a+连接后转化到BL21(DE3)获得工程菌BL21(DE3)/pET32a+DuIFN—α,对其表达产物的纯化和复性关键技术及其抗水疱性口炎病毒(VSV)、鸭瘟强毒(DPV)活性进行研究。结果表明:BL21(DE3)/pET32a+-DuIFN-α经0.4mmol/LIPTG诱导获得高效表达,表达的重组蛋白相对分子质量约37ku,以包涵体形式存在;重组蛋白经镍金属螯合介质(Ni—MIAC)进行纯化和复性后获得理想效果,其抗VSV活性的比活力达到12800U/mg;利用定量PCR检测到15U/mL的重组DuIFN-α对鸭瘟强毒表现出抑制作用,为重组DuIFN—α的临床应用提供试验数据。
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关 键 词: | 鸭IFN-α 成熟肽基因 原核表达 色谱复性 抗病毒活性 |
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