| 马氏珠母贝ISSR-PCR反应条件优化 |
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| 引用本文： | 吕林兰,杜晓东,王嫣,石耀华,王爱民. 马氏珠母贝ISSR-PCR反应条件优化[J]. 安徽农业科学, 2006, 34(22): 5806-5807,5855 |
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| 作者姓名： | 吕林兰 杜晓东 王嫣 石耀华 王爱民 |
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| 作者单位： | 盐城工学院,江苏盐城,224003;广东海洋大学,广东湛江,524025;海南大学海洋学院,海南海口,570228;海南省热带水生生物技术重点实验室,海南海口,570228 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（39969003,30360084）;国家863计划项目（2（XY2AA603022）. |
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| 摘 要： | 采用ISSR技术对马氏珠母贝进行PCR扩增,100个引物筛选出48个呈阳性反应的引物。对影响ISSR-PCR反应的Mg2+浓度、模板浓度T、aq酶浓度、引物退火温度和反应循环数进行了优化,并对甲酰胺对试验的影响进行了初步探讨。结果表明:优化的马氏珠母贝ISSR反应条件为①反应体系2.5μl 10×buffer,镁离子浓度1.5 mmol/L,Taq酶1.0 U,200 nmmol/L ISSR引物,模板浓度为50 ng/μl,2%甲酰胺,0.10 mmol/L dNTP,加双蒸水至总体积25μl;②反应程序预变性94℃,5 min;变性94℃,30 s;退火52℃,1 min;延伸72℃,2 min;39个循环;延伸72℃,7 min。
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| 关 键 词： | 马氏珠母贝 ISSR 优化 条件 |
| 文章编号： | 0517-6611（2006）22-5806-02 |
| 收稿时间： | 2006-08-26 |
| 修稿时间： | 2006-08-26 |
Optimization of the ISSR-PCR Reaction Conditions of Pinctada martensi D |
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| Lv Linlan. Optimization of the ISSR-PCR Reaction Conditions of Pinctada martensi D[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2006, 34(22): 5806-5807,5855 |
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| Authors: | Lv Linlan |
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