| 牡蛎诺如病毒受体类Lewis抗原合成相关基因CgFUT5的克隆与表达鉴定 |
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| 引用本文： | 桂彬彬,曲梦,张蔚然,李明玉,江艳华,姚琳,王联珠.牡蛎诺如病毒受体类Lewis抗原合成相关基因CgFUT5的克隆与表达鉴定[J].南方水产科学,2023(6):150-157. |
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| 作者姓名： | 桂彬彬 曲梦 张蔚然 李明玉 江艳华 姚琳 王联珠 |
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| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院黄海水产研究所/农业农村部水产品质量安全检测与评价重点实验室;2. 大连工业大学食品学院;3. 上海海洋大学食品学院;4. 中国海洋大学食品科学与工程学院 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目(2017YFC1600703)；;国家自然科学基金青年科学基金项目(31101883)；;国家现代农业产业技术体系(CARS-49)； |
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| 摘 要： | Lewis抗原被认为是诺如病毒特异性结合受体，作为诺如病毒传播载体，牡蛎中也存在着类Lewis抗原，但牡蛎合成这种碳水化合物的途径尚未阐明。为解析牡蛎中诺如病毒受体类Lewis抗原的合成路径，利用cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA ends, RACE)技术克隆得到太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)的CgFUT5基因全序列并进行生物信息学分析，通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)分析其在5种组织中的表达情况。构建原核表达质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)实现异源表达，并通过免疫印迹法(Western blot)鉴定免疫原性。克隆得到了具有1 173 bp开放阅读区的CgFUT5基因cDNA序列，系统发育树显示CgFUT5基因与多个物种具有合成Lewis抗原功能的岩藻糖基转移酶基因遗传学关系较近。重组CgFUT5蛋白可在大肠杆菌中过量表达，且表达的重组CgFUT5蛋白与抗人FUT5抗体及抗6×His标签抗体均能特异性结合。研究发现CgFUT5基因在牡蛎鳃组织中大量表达，CgFUT5蛋白与人FUT5蛋白具...
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| 关 键 词： | 太平洋牡蛎 CgFUT5基因 克隆 组织表达 原核表达 |
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