鸡OATP1B3互作蛋白筛选及其相关基因的转录表达分析

【目的】筛选鉴定鸡有机阴离子转运多肽1B3(OATP1B3)的互作蛋白，并探究其对鸡蛋绿壳颜色形成的影响，为提高绿壳蛋鸡群体选育准确性提供参考依据。【方法】以真核表达载体p EGFP-SLCO1B3和空载体pEGFP-C1分别转染绿壳型赤水乌骨母鸡蛋壳腺上皮细胞，通过免疫共沉淀（Co-IP）结合液相色谱与串联质谱联用技术（LC-MS/MS）筛选鸡OATP1B3互作蛋白，经GO功能注释分析、KEGG信号通路富集分析及蛋白相互作用网络分析鉴定出与鸡蛋绿壳性状形成相关的OATP1B3互作蛋白。同时，通过构建SLCO1B3基因沉默及过表达载体分别转染蛋壳腺上皮细胞，检测SLCO1B3基因过表达或沉默时部分OATP1B3互作蛋白基因（FXR1、CTTN、RPL12和RPS17）在蛋壳腺上皮细胞中的表达情况，并根据鸡蛋壳颜色分为白壳、浅绿和深绿3种类型，分析蛋壳颜色△a*值与FXR1、CTTN、RPL12和RPS17基因表达的相关性。【结果】共筛选鉴定出37个与鸡OATP1B3相互作用的蛋白，其中FXR1、CTTN、RPL12和RPS17与鸡蛋的绿壳性状有密切关系。SLCO1B3基因过表达能极显著...