血清4型禽腺病毒penton蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 |
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引用本文: | 罗思思,邓显文,谢芝勋,张艳芳,张民秀,谢志勤,谢丽基,李孟,王盛,李小凤.血清4型禽腺病毒penton蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J].南方农业学报,2023(10):3092-3099. |
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作者姓名: | 罗思思 邓显文 谢芝勋 张艳芳 张民秀 谢志勤 谢丽基 李孟 王盛 李小凤 |
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作者单位: | 广西兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国(广西)—东盟跨境动物疫病防控重点实验室 |
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基金项目: | 广西自然科学基金项目(2020GXNSFBA 297104); |
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摘 要: | 【目的】制备和鉴定血清4型禽腺病毒(FAdV-4)五邻体(penton)蛋白单克隆抗体,为深入探究penton蛋白在FAdV-4感染致病机制中的作用及为抗原检测试剂研发提供抗体材料。【方法】以原核表达的FAdV-4 penton重组蛋白免疫6~8周雌性BALB/c小白鼠,加强免疫3次后,取鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,通过penton-酶联免疫吸附剂测定(ELISA)和FAdV4 virus-ELISA方法分别筛选阳性杂交瘤细胞株,对筛选出的单克隆抗体杂交瘤细胞株进行亚类鉴定、特异性和广谱性鉴定及间接免疫荧光和稳定性试验。【结果】亚类鉴定结果表明,筛选获得7株能稳定分泌抗FAdV-4 penton蛋白的杂交瘤细胞株(1D11、2B3、2C4、2C9、6B3、8F12和8G11),其轻链均为Kappa链,重链3株为IgG1,4株为IgG2b;特异性检测结果表明,7株单克隆抗体只与FAdV-4反应,不与其他11种血清型FAdV及NDV、ARV、EDSV和IBV等常见禽病病原体发生交叉反应;广谱性鉴定结果表明,7株单克隆抗体均可与19株FAdV-4分离株结合,广谱性好;间接免...
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关 键 词: | 血清4型禽腺病毒 penton蛋白 单克隆抗体 杂交瘤细胞株 |
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