| 禽传染性支气管炎病毒nsp4蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究 |
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| 引用本文： | 卢彦澎,林丽婷,任丽娜,晋英浩,张桃妮,张愉,韦兰萍,吕迪,磨美兰.禽传染性支气管炎病毒nsp4蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究[J].南方农业学报,2023(8):2423-2435. |
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| 作者姓名： | 卢彦澎 林丽婷 任丽娜 晋英浩 张桃妮 张愉 韦兰萍 吕迪 磨美兰 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学动物科学技术学院;2. 广西兽用生物制品工程研究中心;3. 广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室;4. 广西高校动物疫病预防与控制重点实验室 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金项目（2019GXNSFAA245009,2020GXNSFDA297004）~~； |
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| 摘 要： | 【目的】筛选出禽传染性支气管炎病毒（IBV）非结构蛋白4(nsp4)抗原性较好的氨基酸区域并制备多克隆抗体，为进一步研究nsp4蛋白在IBV复制过程中的功能提供物质基础，也为研发IBV新型诊断试剂盒与疫苗打下基础。【方法】对IBV Beaudette株nsp4蛋白进行原核表达，以融合蛋白nsp4作为免疫原免疫健康日本大耳白兔和健康阴性鸡，制备相应的兔多克隆抗体和鸡多克隆抗体，并通过间接ELISA检测、Western blotting检测及IFA验证等对制备获得的多克隆抗体进行生物学功能研究。【结果】选取nsp4蛋白第408～514位氨基酸作为原核表达序列，成功构建了nsp4蛋白原核表达载体pCZN-1-HIS-nsp4和nsp4蛋白真核表达载体pVAX1-nsp4-HA。原核表达的融合蛋白nsp4为13.6 kD，与预期结果相符，能与IBV GX-YL5株和M41株全病毒阳性血清反应。制备的兔、鸡多克隆抗体血清效价分别为1∶128000和1∶6400，均能与融合蛋白nsp4和IBV全病毒反应，且与IBV GX-YL5株、Beaudette株和M41株感染鸡胚肾细胞（CEK）表达的nsp...
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| 关 键 词： | 禽传染性支气管炎病毒(IBV) nsp4蛋白 多克隆抗体 反应性 特异性 |
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