褐飞虱RNAi显微注射中麻醉方法的比较 |
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作者姓名: | 张朋稳 段至柔 刘常权 彭英传 张万娜 肖海军 张晶 |
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作者单位: | 1. 江西农业大学农学院昆虫研究所;2. 北京林业大学草业与草原学院 |
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基金项目: | 江西省自然科学基金(20212BAB21501); |
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摘 要: | 显微注射dsRNA以实现系统性干扰,是一种有效且能准确评估基因功能的常用方法。试验靶标昆虫由于个体较小、活力强,注射前需要先适当麻醉。待显微注射dsRNA完成后,麻醉效应解除,方进一步开展表型测定试验。不同麻醉方法可对昆虫的麻醉效果、麻醉后生理和行为等产生不同程度的影响。因此,选用合适的麻醉方法对显著减少RNAi显微注射试验误差,提升干扰效率具有重要意义。本文以褐飞虱为评估对象,比较应用不同配比的乙醚与乙酸乙酯混合液麻醉,以及应用低温麻醉对褐飞虱的麻醉效应,并测定不同的麻醉方法对RNAi显微注射试验中褐飞虱存活率的影响。麻醉剂处理随乙酸乙酯的浓度升高,褐飞虱的苏醒时间延长。应用不同麻醉方法对RNAi显微注射试验中褐飞虱存活率的影响程度从小到大依次为乙醚:乙酸乙酯(1:2),乙醚:乙酸乙酯(1:1),乙醚,乙醚:乙酸乙酯(2:1),乙醚:乙酸乙酯(3:1),冰上20min,冰上40min。推荐乙醚:乙酸乙酯(1:2)混合液作为最优麻醉处理应用于褐飞虱RNAi显微注射试验。
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关 键 词: | 褐飞虱 液体麻醉 低温麻醉 显微注射 RNA干扰 |
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