褐飞虱RNAi显微注射中麻醉方法的比较

显微注射dsRNA以实现系统性干扰，是一种有效且能准确评估基因功能的常用方法。试验靶标昆虫由于个体较小、活力强，注射前需要先适当麻醉。待显微注射dsRNA完成后，麻醉效应解除，方进一步开展表型测定试验。不同麻醉方法可对昆虫的麻醉效果、麻醉后生理和行为等产生不同程度的影响。因此，选用合适的麻醉方法对显著减少RNAi显微注射试验误差，提升干扰效率具有重要意义。本文以褐飞虱为评估对象，比较应用不同配比的乙醚与乙酸乙酯混合液麻醉，以及应用低温麻醉对褐飞虱的麻醉效应，并测定不同的麻醉方法对RNAi显微注射试验中褐飞虱存活率的影响。麻醉剂处理随乙酸乙酯的浓度升高，褐飞虱的苏醒时间延长。应用不同麻醉方法对RNAi显微注射试验中褐飞虱存活率的影响程度从小到大依次为乙醚:乙酸乙酯（1:2），乙醚:乙酸乙酯（1:1），乙醚，乙醚:乙酸乙酯（2:1），乙醚:乙酸乙酯（3:1），冰上20min，冰上40min。推荐乙醚:乙酸乙酯（1:2）混合液作为最优麻醉处理应用于褐飞虱RNAi显微注射试验。