花生区组间杂种未成熟籽仁cDNA PCR库的构建与初步筛选 |
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引用本文: | 王传堂,杨新道,陈殿绪,王东.花生区组间杂种未成熟籽仁cDNA PCR库的构建与初步筛选[J].花生学报,2003,32(Z1):291-294. |
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作者姓名: | 王传堂 杨新道 陈殿绪 王东 |
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作者单位: | 山东省花生研究所,山东,青岛,266100 |
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基金项目: | 国家科学技术部863项目、山东省农科院花生基因工程项目、山东省花生研究所重点项目 |
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摘 要: | 从不亲和野生花生Arachis glabrata Benth与栽培种种间杂种中提取mRNA,反转录成cDNA双链并连接上接头,用接头上的引物进行PCR高保真扩增,成功建立了花生cDNA PCR库.用光敏生物素标记的探针与链亲和素包被的磁珠进行杂交筛库,与探针杂交的片段经洗脱、高保真扩增并加A后与T载体连接,转化受体菌XL1-Blue,获得白色阳性克隆菌落.用PCR快速鉴定的方法进行阳性菌落筛选,得到目的阳性克隆后测序,将可得到cDNA全编码区序列.本研究为改良花生品质与抗性奠定了基础.
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关 键 词: | 花生 ω-6油酸去饱和酶(DES)基因 花生白藜芦醇合酶(RS)基因 克隆 cDNAPCR库构建 筛选 |
文章编号: | 1002-4093(2003)增刊-0291-04 |
修稿时间: | 2003年8月29日 |
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