| 鸡柔嫩艾美尔球虫ZJ株3-1E基因的原核表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 徐慧,张红丽,曲道峰,周前进,杜爱芳.鸡柔嫩艾美尔球虫ZJ株3-1E基因的原核表达及鉴定[J].中国预防兽医学报,2008,30(2):122-126. |
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| 作者姓名： | 徐慧 张红丽 曲道峰 周前进 杜爱芳 |
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| 作者单位： | 浙江大学,动物预防医学研究所,浙江,杭州,310029 |
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| 基金项目： | 浙江省嘉兴市科技局重点项目 |
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| 摘 要： | 本实验对E．tenellaZJ株的3-1E基因进行了克隆和表达。根据已报道的柔嫩艾美尔球虫3-1E基因序列设计引物，以孢子化卵囊总RNA为模板，用RT—PCR方法扩增得到一条特异片段，将扩增产物克隆至pUCM—T，转化感受态菌DH5仅，经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列比较，核苷酸同源性为99．5％。然后将重组质粒和表达载体pET-30a分别以EcoRⅠ、SalⅠ酶切后构建重组表达载体pET-30a-3—1E，并将其转化入大肠杆菌BL21中，提取质粒经酶切和PCR鉴定正确后，用IPTG诱导表达。表达产物经SDS—PAGE和Westernblot检测显示，3-1E基因在大肠杆菌中成功表达；融合蛋白的分子量约为27ku，诱导6h的蛋白表达量可达到47、024％。
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| 关 键 词： | 柔嫩艾美尔球虫 3-1E基因 RT-PCR 原核表达 柔嫩艾美尔球虫 基因 原核表达 Expression gene strain Tenella 蛋白表达量 分子量 融合蛋白 检测显示 Western blot 诱导表达 IPTG 粒经 提取 大肠杆菌 重组表达载体 酶切 |
| 文章编号： | 1008-0589（2008）02-0122-05 |
| 收稿时间： | 2007-06-09 |
| 修稿时间： | 2007年6月9日 |
Expression of E. Tenella ZJ strain 3-1E gene in E. Coli |
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| XU Hui,ZHANG Hong-li,QU Dao-feng,ZHOU Qian-jin,DU Ai-fang.Expression of E. Tenella ZJ strain 3-1E gene in E. Coli[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(2):122-126. |
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| Authors: | XU Hui ZHANG Hong-li QU Dao-feng ZHOU Qian-jin DU Ai-fang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Eimeria teneUa RT-PCR 3-1E gene prokaryotic expression |
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