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栓皮栎RAPD反应条件优化研究
引用本文:任耀忠,张文辉,刘莉丽,李周岐,周建云,张存旭.栓皮栎RAPD反应条件优化研究[J].西北林学院学报,2009,24(2).
作者姓名:任耀忠  张文辉  刘莉丽  李周岐  周建云  张存旭
作者单位:西北农林科技大学,西部环境与生态教育部重点实验室,陕西,杨陵,712100
基金项目:国家自然科学基金,中国科学院西部行动计划项目 
摘    要:通过单因素2循环试验对栓皮栎RAPD反应条件进行系统优化,探讨了RAPD各反应条件间的交互作用,建立了栓皮栎RAPD的最佳反应体系和扩增程序.结果表明:(1)各反应因素对栓皮栎RAPD扩增具有不同影响,各因素间的交互作用明显,单因素多循环试验设计能够有效的减少其交互作用、优化出RAPD扩增的最佳反应体系和程序;(2)适合栓皮栎RAPD反应的体系总体积为20 μL,模板DNA用量30 ng,Taq DNA聚合酶用量1.75U,引物用量8 pmol,Mg2+浓度2.0 mmol·L-1,dNTPs浓度0.25 mmol·L-1,10×Buffer 2 μL;适合栓皮栎RAPD扩增的程序是94℃预变性4 min,94℃变性40 S,40℃退火30 s,72℃延伸2 min,40个循环,72℃延伸10 min.

关 键 词:栓皮栎  体系优化

Optimization of RAPD in Quercus variabilis
REN Yao-zhong,ZHANG Wen-hui,LIU Li-li,LI Zhou-qi,ZHOU Jian-yun,ZHANG Cun-xu.Optimization of RAPD in Quercus variabilis[J].Journal of Northwest Forestry University,2009,24(2).
Authors:REN Yao-zhong  ZHANG Wen-hui  LIU Li-li  LI Zhou-qi  ZHOU Jian-yun  ZHANG Cun-xu
Abstract:
Keywords:RAPD
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