鸵鸟胚原代组织细胞的培养及鉴定

为研究鸵鸟胚成纤维、肝、肾、脑组织原代细胞的体外分离培养方法，试验选择28胚龄的鸵鸟胚组织，通过胰蛋白酶消化法与组织块贴壁培养法分离培养原代细胞。通过细胞HE染色形态观察、细胞活性与生长曲线测定、RT-qPCR测定细胞基因标志物对细胞类型进行鉴定。结果显示：组织块贴壁法培养的细胞12 h后开始生长，胰酶消化法分离培养的细胞，4 h后开始贴壁生长，且采用胰酶消化法获得的细胞传代后状态良好，生长变快；HE染色显示成纤维细胞、肝细胞与肾细胞为多角形或长梭形，脑细胞多呈星状与三角形；RT-qPCR结果显示，与原代细胞相比次代细胞的标志物基因ALB、CD105、CD90、CD73、WT-1、Emx-2、Wnt-4、CD133 mRNA表达水平均明显升高。研究表明，利用胰酶消化法与组织块贴壁培养法均可分离出鸵鸟胚原代细胞，但胰酶消化法分离的细胞更适合后期深入研究细胞功能，为进一步研究奠定基础。