犬血浆中特比萘芬的高效液相色谱检测方法

建立并优化一种简单、快速、灵敏、高选择性的HPLC方法测定犬血浆中特比萘芬血药浓度,并考察方法的稳定性。特比萘芬血浆样品经提取剂乙腈-异丙醇(用磷酸调p H至3.0)(40:60,V/V)液-液萃取后,提取液经40℃氮气吹干,用流动相复溶后离心过滤,取上清液20μL进样分析,对血样处理后及标准溶液保存不同时间后的稳定性进行了考察。色谱柱Agilent 5 HC-C18(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%磷酸水(59:41,V/V);流速0.8 m L/min;紫外检测波长223 nm;柱温35℃。色谱峰分离良好,无干扰。特比萘芬最低检测浓度为0.01μg/m L,线性范围是0.02~5μg/m L,相关回归方程:y=356.28x-2.0311(r2=0.99989)。低、中、高血浆质控样品日内RSD均小于5%,日间RSD均小于7%,方法平均回收率分别为108.9%,100.4%,102.1%。血样处理后8 h内样品能保持较好稳定性,血样处理后3次循环冻融能保持较好稳定性。血样处理后于-20℃条件下冻存能够保持稳定2个月,标准溶液有效保存期同样为2个月。本研究建立的特比萘芬血样浓度测定方法有较高的准确度和灵敏度,适用于候选化合物的体内药代动力学研究。

Development of HPLC method for the determination of Terbinafine in dog plasma