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寨卡病毒SYBR GreenⅠreal-time PCR方法的建立及应用
作者姓名:于宁  刘宇梦  李成辉  李卓昕  汪伟  孙文超  鲁会军  金宁一
作者单位:军事科学院军事兽医研究所;延边大学农学院;广西大学动物科学技术学院;温州大学病毒学研究所
基金项目:国家科技重大专项(2018ZX10101003,2018ZX10102001);浙江省青年基金项目(LQ19C180001);温州市基础性科研项目(N20190005,N20180010)。
摘    要:为建立一种针对寨卡病毒的快速诊断方法,本研究根据寨卡病毒的3’端保守基因序列,设计合成1对引物,建立了检测寨卡病毒的荧光定量PCR方法。结果显示:所建立的检测方法的Ct值与标准品在1.41×10^1~1.41×10^10^ copies/μL具有良好的线性关系,相关性为1,斜率为-3.502;灵敏性结果显示,该方法的检测限度为1.41×10^1 copies/μL,是普通PCR的10000倍;特异性结果显示,对CHIKV、DENV和JEV无特异性扩增,特异性强;重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于1%,重复性好。本研究建立的SYBR Green I real-time PCR检测方法,可用于寨卡病毒感染的快速诊断。

关 键 词:寨卡病毒  SYBR  GreenⅠreal-time  PCR  应用方法
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