石蒜黄烷酮3–羟化酶基因LrF3H 的克隆及表达分析

 采用RT-PCR 和RACE 技术相结合的方法，从石蒜花瓣中克隆到1 个黄烷酮3–羟化酶（F3H）基因的cDNA 全长序列，全长1 293 bp，包含1 098 bp 的完整开放阅读框，编码365 个氨基酸；氨基酸序列比对显示该序列编码的氨基酸与水仙的F3H 具有高达91%的同源性，将其命名为LrF3H。二级结构预测表明，随机卷曲是LrF3H 蛋白最大量的结构元件，而α–螺旋和延伸链散布于整个蛋白中。保守结构域预测表明该基因编码的蛋白具有典型的F3H 蛋白功能结构域，其保守结构域中含有铁离子及2–O–酮戊二酸结合位点，属于2OG-FeⅡ_Oxy 双加氧酶超家族。实时荧光定量PCR 分析表明，LrF3H 在整个花发育过程中均表达，而且从初蕾期到盛开期随着花瓣着色加深表达量逐渐增加，盛开期表达量最高，之后随着花朵萎蔫表达量下降；在不同器官中，LrF3H 的表达量在花瓣和花葶中最高，而在根、鳞茎和叶片中都很低，推测该基因在石蒜花色形成过程中起着关键作用。

Cloning and Expression Analysis of Flavanone 3-hydroxylase Gene LrF3H from Lycoris radiate