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冷冻保存能降低绵羊卵母细胞受精能力
引用本文:田树军,孙树春,闫长亮,朱士恩,杨慧欣. 冷冻保存能降低绵羊卵母细胞受精能力[J]. 中国兽医学报, 2008, 28(10)
作者姓名:田树军  孙树春  闫长亮  朱士恩  杨慧欣
作者单位:1. 河北农业大学动物科技学院,河北,保定,071001;中国农业大学动物科技学院,北京,100094;河北省牛羊胚胎工程技术研究中心,河北,保定,071001
2. 河北农业大学动物科技学院,河北,保定,071001
3. 中国农业大学动物科技学院,北京,100094
摘    要:本实验研究了体外成熟绵羊卵母细胞在舍抗冻保护荆DMS()和EG的冷冻液中暴露和OPS法玻璃化冷冻保存后对体外受精卵裂率、精子入卵率、皮质颗粒分布、酶溶解透明带时间及雌原核形成的影响.将体外成熟24 h的绵羊卵母细胞分为3组:(1)对照组,卵母细胞不进行处理;(2)毒性组,卵母细胞在冷冻液中进行暴露但不投入液氮中冷冻;(3)冷冻组,卵母细胞利用OPS法进行玻璃化冷冻.处理组卵母细胞在浓度递减的蔗糖溶液中脱除抗冻保护剂.结果,卵母细胞体外受精的卵裂率和单精子入卵率,毒性组(62.3%和29.3%)和冷冻组(67.6%和28.2%)显著低于对照组(78.4%和45.0%)(P<0.05),毒性组和冷冻组间无显著差异(P>0.05).为了研究冷冻保存导致卵母细胞受精能力降低的机制,处理组及对照组一部份卵母细胞分别于处理后0 h(IVM24 h)、2 h(IVM26 h)和体外受精后12 h(IVFl2 h)测定皮质颗粒分布和用0.1%链霉蛋白酶溶解透明带时间,另一部份卵母细胞则在不含有精子的受精液中孵育12 h后测定雌原核形成率.结果,在IVM24 h和IVM26 h,皮质颗粒呈完全释放的比例,毒性组(41.2%和40.8%)和冷冻组(41.7%和51.8%)显著性高于对照组(7.1%和18.4%)(P<0.05);IVM26 h酶溶解透明带时间,毒性组(435.6±16.6)s和冷冻组(422.3±14.6)s显著长于对照组(381.6±15.3) s(P<0.05);雌原核形成率,毒性组(58.7%)和冷冻组(63.9%)组显著高于对照组(8.2%)(P<0.05).上述结果表明,舍DMS()和EG的冷冻液对体外成熟绵羊卵母细胞具有孤雌激活作用,引起皮质颗粒的提前释放,导致透明带变硬,降低卵母细胞的受精能力.

关 键 词:绵羊  卵母细胞  玻璃化冷冻  孤雌激活

Parthenogenetic activation induced by vitrification solution can decrease sperm penetration rate of in vitro matured ovine oocytes
TIAN Shu-jun,SUN Shu-chun,YAN Chang-liang,ZHU Shi-en,YANG Hui-xing. Parthenogenetic activation induced by vitrification solution can decrease sperm penetration rate of in vitro matured ovine oocytes[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2008, 28(10)
Authors:TIAN Shu-jun  SUN Shu-chun  YAN Chang-liang  ZHU Shi-en  YANG Hui-xing
Abstract:
Keywords:DMSO  EG
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