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新型穿膜肽介导 p53融合蛋白的表达及其免疫原性分析
引用本文:赵博,刘婷,孙梅,赖利金,付爱玲,徐兴然. 新型穿膜肽介导 p53融合蛋白的表达及其免疫原性分析[J]. 西南大学学报, 2015, 0(2)
作者姓名:赵博  刘婷  孙梅  赖利金  付爱玲  徐兴然
作者单位:西南大学药学院,重庆,400715
基金项目:国家自然科学基金(81273416);国家大学生创新实验计划(201210635075).
摘    要:目的:原核表达新型细胞穿膜肽RDP介导p53融合蛋白,并检测其免疫原性的强弱.方法:以质粒pET28a‐p53为模板扩增p53基因,并克隆至原核表达载体pET28a‐RDP中,构建重组表达质粒pET28a‐RDP‐p53,转化至大肠杆菌Rosetta ,IPTG诱导表达蛋白并纯化,SDS‐PAGE确定该蛋白准确性.同时,将昆明小鼠分为空白对照组(等容生理盐水)和RDP‐p53融合蛋白高、中、低剂量(4 mg/kg ,2 mg/kg ,1 mg/kg)组,经腹腔注射免疫,每隔2 d给药1次,30 d后眼球取血,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中IgG的含量.结果:双酶切及测序结果显示, p53基因已克隆入表达载体中;RDP‐p53融合蛋白在上清和沉淀中均获得表达.ELISA测定结果表明,与对照组比较,低、中剂量组小鼠血清中IgG含量没有明显升高(p>0.05),高剂量组显著升高(p<0.05).结论:成功表达并纯化RD P‐p53融合蛋白,其免疫原性较弱且与给药剂量相关,为进一步研究RD P‐p53融合蛋白对脑肿瘤的药理作用奠定基础.

关 键 词:p53  RD P  细胞穿膜肽  免疫原性

Expression and Immunogenicity Analysis of p53 Protein Fused with a New Cell-Penetrating Peptide
ZHAO Bo,LIU Ting,SUN Mei,LAI Li-jin,FU Ai-ling,XU Xing-ran. Expression and Immunogenicity Analysis of p53 Protein Fused with a New Cell-Penetrating Peptide[J]. Journal of Southwest Agricultural University, 2015, 0(2)
Authors:ZHAO Bo  LIU Ting  SUN Mei  LAI Li-jin  FU Ai-ling  XU Xing-ran
Abstract:
Keywords:p53  RDP  cell-penetrating peptide (CPP)  immunogenicity
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