草鱼体外培养细胞中β-萘黄酮对CYP1A基因表达的诱导 |
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引用本文: | 林茂,杨先乐,纪荣兴.草鱼体外培养细胞中β-萘黄酮对CYP1A基因表达的诱导[J].水产学报,2010,34(6):685-690. |
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作者姓名: | 林茂 杨先乐 纪荣兴 |
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作者单位: | 1. 集美大学水产学院,福建,厦门,361021;上海海洋大学农业部渔业动植物病原库,上海,201306 2. 上海海洋大学农业部渔业动植物病原库,上海,201306 3. 集美大学水产学院,福建,厦门,361021 |
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基金项目: | 现代农业产业技术体系建设专项资金(NYCYTX4917);国家自然科学基金项目(30371109) |
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摘 要: | 为了建立以CYP1A cDNA为探针的水环境毒理学细胞模型,以β-萘黄酮(BNF)作为诱导剂,通过半定量PCR技术研究CYP1A在草鱼不同细胞系及其对应组织中的诱导表达情况。在半定量PCR反应参数研究中,对关键的退火温度和循环次数进行了优化,结果显示退火温度为57 ℃,循环次数为30次较为合适,该条件下Gauss迹量的CYP1A/ACT比值能更准确的反映CYP1A的表达水平。对照组和诱导组草鱼细胞中ACT和CYP1A cDNA扩增结果表明,细胞中CYP1A的基础表达量较低,而BNF诱导使GCL、CIK和CO细胞中CYP1A的表达水平得到显著的提高。GCL、CIK和CO细胞三者之间诱导后CYP1A的表达水平有显著差异(P<0.05),诱导表达量大小顺序为GCL>CIK>CO。草鱼细胞系的相应组织中ACT和CYP1A cDNA扩增以及电泳的结果与细胞中较为相似,组织中CYP1A诱导表达量大小顺序也与相应的细胞相同:肝>肾>卵巢。比较分析的结果表明,CYP1A在体内与体外的诱导表达水平具有一定的相关性。
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关 键 词: | 草鱼 细胞 CYP1A cDNA 诱导 |
收稿时间: | 2/7/2010 12:00:00 AM |
修稿时间: | 4/7/2010 12:00:00 AM |
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